采访藤冈洋一郎博士

北海道大学医学部,生理科学系,生理学专业

您能向我们介绍一下您的科学背景和研究方向吗?

北海道大学 Ohba 教授

我作为细胞生物学家在东京大学获得了哲学博士学位。我在北海道大学 Yusuke Ohba 教授的实验室完成了博士后研究,在显微镜检查,尤其是活细胞成像方面的积累了诸多经验。我们的研究方向是信号转导的时空关系,包括膜运输和细胞器生物学。更具体地说,我正在研究病毒进入宿主细胞的机制以及细胞对病毒的反应。

当您购买一台新显微镜时,您是如何最终选择 CrestOptics 系统的?

我们以前曾经用的是转盘显微镜,但是视野不够宽,于是我们设法寻找视野更大的共焦转盘显微镜。而且,我们以前还购买过 X-Light V2,这是一个非常好的系统,所以我们选择 X-Light V3 转盘系统非常顺理成章。

您能描述一下您的显微镜装置吗?

在 Ohba 教授的实验室,我们将 X-Light V3 转盘与 DeepSIM X-Light 结合在一个倒置的 Nikon Ti上,带有培养装置 (stage top incubator)、双 Prime BSI 相机,使用 VisiView 软件操作。

X-Light V3 转盘的哪些功能有助于您的研究?

我们以前用的转盘显微镜,可以观察许多样品,但不能同时对许多细胞成像。而 X-Light V3 的尺寸更大为 25 mm,我们可以在单个视野中看到更多的细胞。此外,我们通常使用内体标记蛋白,这种蛋白的过度表达会导致细胞质错误定位,尽管荧光方法很容易检测到。但是当表达水平很低时,我们用传统的共聚焦显微镜是观察不到的。相反,X-Light V3 却令我们能够轻松检测到如此之低强度的信号,我们对此感到非常欣喜。利用 X-Light V3 观察许多其他细胞器的情况也是如此,由于其具有高通量成像优势,所以我们可以观察到这一事件。我们还能够分辨非常小的细胞器结构,因此系统的分辨率是另一个非常重要的特征。

“我们还能够分辨非常小的细胞器结构,因此 CrestOptics 系统的分辨率对我们而言是另一个非常重要的特征”

您使用 DeepSIM 超分辨率系统的体验如何?

我们尝试了许多超分辨率系统,但很难对活细胞中的样品实现超分辨率成像。例如,我们无法检测到微弱的信号。如今,我们可以使用 DeepSIM 轻松地对各种活体样本进行超分辨率成像,而无三种不同颜色影响的压力,并且该系统配备一个显微镜用培养装置 (stage top incubator)。

“如今,我们可以使用 DeepSIM 轻松地对各种活体样本进行超分辨率成像”

在您的实验室中,还有其他应用使用 CrestOptics 装置吗?

我们有许多合作者,并为他们进行成像。下面是一些例子,比如通过脑组织成像,研究外泌体转运情况;通过细胞融合分析,研究新型冠状病毒 SARS-CoV-2 变种的特性;通过观察病毒进入宿主细胞,研究 HBV 感染。

您邀请我们参加您组织的成像训练营。您愿意分享更多关于成像训练营的见解吗?

我们每年都举办成像训练营,这次是第 10 届,将于 2023 年 1 月 16 日开始,1 月 20 日结束。主题是转盘共焦和超分辨率显微镜。训练营的课程包括理论和实践两部分,使用两种 CrestOptics 配置进行演示和实践:X-Light V3+DeepSIM X-Light 和 DeepSIM 独立系统

要了解更多关于“成像训练营 2023”的信息,请阅读此处并访问网页。

感谢 Givetech 提供安装支持。

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